用于為 Lambda 載體制備基因組 DNA 的一體化易用型試劑盒。
1、 執(zhí)行 5’突出末端的完整補(bǔ)平以生成平末端進(jìn)行直接連接。
2、使用 [α-32P]dNTP 對(duì) 5’突出末端進(jìn)行放射性末端標(biāo)記。
3、包括作為對(duì)照的預(yù)消化 DNA。
4、樣品 DNA 應(yīng)在執(zhí)行補(bǔ)平反應(yīng)進(jìn)行苯酚氯仿提取和乙醇沉淀。
5、先向反應(yīng)混合物中加入 DNA、補(bǔ)平緩沖液和 dNTP，后加入 Klenow 聚合酶，請(qǐng)勿將反應(yīng)混合物長(zhǎng)時(shí)間置于冰上。
| 單位定義 | 1 - 1.5 μg DNA 應(yīng)使用五單位 |
| 底物類(lèi)型 | DNA |
| 每個(gè)試劑盒的反應(yīng)次數(shù) | 25 |
選擇 Klenow Fill-In 試劑盒執(zhí)行部分補(bǔ)平反應(yīng)，從而執(zhí)行 5’ 突出末端的完整補(bǔ)平以生成平末端并進(jìn)行直接連接?；蛘?，利用試劑盒通過(guò) [α32P]dNTP 對(duì) 5’突出末端進(jìn)行放射性末端標(biāo)記。
Klenow Fill-in 試劑盒包含 Klenow 片段 (125 U)、dNTP（各 10 mM 儲(chǔ)備液）、Klenow 反應(yīng)緩沖液、可用作對(duì)照的預(yù)消化 DNA 以及用于 25 個(gè)反應(yīng)的充足材料。
僅限研究使用，不可用于診斷目的。
| 部件號(hào) | Reg. Status | 說(shuō)明 |
| 200410 | RUO | Klenow Fill-In Kit |
| 600069 | RUO | Obsolete (Exo- Klenow DNA Polymerase). |
